一、什么是手术冰冻化验

手术冰冻化验还可以称之为快速冰冻病理检查，这种检查是在手术过程中由外科医师开展，其能在短时间内检出与手术方案有关的疾病诊断问题，通常在30分钟内。在手术过程中将人体组织切下送往病理科，为保障在短时间内完成检查，往往在一处检查部位选取1~2组织。且既然称之为术中快速冷冻，除了要迅速，还需“冷”。冰冻切片与石蜡切片一样，在切片前，需将其制作成“块”。由于冰冻切片不能用水，水在冰冻时会产生晶体，导致组织与细胞形态改变，对医师的诊断造成较大的干扰。为此，针对冰冻切片通常使用OCT包埋剂，其是一种水溶性混合物（聚乙二醇与聚乙烯醇），该混合物类似胶水，冰冻后不会产生结晶，溶于水。在短时间内冰冻后，给予切片、贴片，贴片主要是指将切好的组织贴在载玻片上，随后立即放置于固定液中，时间不可超过1分钟。而后给予染色、封片，最后形成冰冻切片。虽然操作过程听起来较繁杂，但上述措施均可在10min内完成，充分体现了快速的特点。且要保障检验治疗，需临床经验丰富的检验科医师进行评估。

术中送检的快速冰冻标本，手术医师通常对受检部位组织会选择1~2块。在冰冻标本制作完成后，可另选择更多病变组织进行石蜡切片检查。同时也会对冰冻后的组织，切片诊断后制作呈蜡块（通常称为冰冻剩余）。在手术完毕后，使用几天时间对比冰冻剩余与石蜡切片的差异，对术中诊断进行复核，以便做出更细致的诊断。

二、什么是石蜡化验

石蜡化验过程中需使用新鲜组织，其是由于组织切除后放置过久会造成蛋白质分解变性进而导致细胞自溶与细菌滋生，从而影响检验结果。将组织切呈大小适中的小块，给予固定，对组织中的物质成分进行凝固，尽可能保障活体时的结构，且能造成组织硬化，为切片提供有利条件；固定后需取出组织内的固定液与结晶沉淀，不然会对后期染色造成较大的影响。注意，为防止组织样本过度收缩，需逐渐提升酒精纯度进行脱处理。因纯酒精难以与石蜡相容，需交替使用酒精与石蜡相溶的媒浸液（常用二甲苯），析出酒精，而后置于二甲苯中，呈现透明状态；使用适量的石蜡代替透明剂，浸入石蜡后可对人体组织起到支持作用。将包埋好的蜡块切片（4~7微米），切出一片接一片的蜡带，用毛笔轻托轻放在纸上。使用粘附剂将蜡片附着于载玻片上，略加温使蜡片铺展，干燥后染色。

三、手术冰冻化验和术后常规石蜡化验的差异

手术冰冻化验的流程通常可在30~60min内完成，而石蜡切片需5~10d。两种检验结果不符合的状况非常正常。冰冻检验在取材过程中具有一定局限性，术中通常仅采取1~2块肉眼可判断有疑问的组织进行切片，由于不能全面的显示病变全貌与本质，可能会造成术后病理结果不一致。同时冰冻制片是对新鲜组织进行迅速低温速冻，促使组织硬化，可切割呈薄片，但仍比石蜡切片厚，对诊断的准确率造成一定影响；其冰冻后组织细胞可能出现变形的状况，从而导致术后结构出现差异；此外，经过冰冻诊断时间有限，有些病变的良恶性质、是否浸润性病变，均需通过免疫组织化学染色、分子病理等检查手段，进行辅助诊断及鉴别诊断，均是在短时间内难以完成的。从而导致手术冰冻化验和术后常规石蜡化验结果不一致。有时候碰到疑难的，这个病理医生无法明确，还要召集整个科室的病理医生一起讨论，讨论了以后才重新做免疫组化，再讨论，才能下最后诊断意见。有些更加复杂疑难的病理，一个医院的病理科室还不够，还要召集整个区域的病理科专家，进行大会诊。因为每一个病理诊断，就决定着后续的整个治疗的走向，特别在癌症领域，关系着一个生命。

(王丽  许昌市中心医院   病理科  461000)